血清及尿白细胞介素-6检测在肾移植中的意义

姜宗培　孙林　张仕光　叶任高

　作者单位：510080广州，中山医科大学附属第一医院肾内科

目的　探讨血、尿IL-6检测在肾移植急性排斥(AR)诊断及鉴别诊断中的作用。方法　应用ELISA技术，分别对肾移植术后不同状态下患者血、尿IL-6水平进行检测。结果　急性排斥及感染患者血IL-6水平较环孢素(CsA)中毒、急性肾小管坏死(ATN)、移植肾功能正常及正常对照组高。尿IL-6在急性排斥及感染组也较CsA中毒、ATN、移植肾功能正常组有明显升高，而急性排斥组较感染组升高更明显。结论　血、尿IL-6水平的升高可作为判断肾移植急性排斥的指标之一；也可作为鉴别急性排斥反应与CsA中毒、ATN的重要参考指标；对鉴别急性排斥反应和感染具一定的参考价值。
关键词　肾移植　急性排斥反应　白细胞介素-6

The significance of detecting IL-6 level from serum and urine in renal transplantation　Jiang Zhongpei,Sun Lin,Zhang Shiguang,et al.Department of Nephrology,The First Affiliated Hospital,Sun Yat-Sen University of Medical Science,Guangzhou 510080
Objective　To study the effect of detecting IL-6 level from serum and urine in diagnosis and differential diagnosis of acute renal allograft rejections.Methods　IL-6 levels of serum and urine in different states of post renal transplantation were measured by ELISA assay.Results　Serum IL-6 level in acute rejection and infections were higher than that in CsA toxicosis,ATN,stable transplantation and normal control(P<0.05).Urine IL-6 level showed the same result observed in serum,but it was higher in acute rejections than in infections(P<0.05).Conclusion　　The elevation of IL-6 level of serum and urine maybe used as one of the signs for diagnosis of acute rejection.The determination of IL-6 level of serum and urine may be used as one of the important indexes for differential diagnosis of acute rejection from CsA toxicosis and ATN.The determination of IL-6 level of serum and urine may also be useful for differential diagnosis of acute rejection from infection.
Key words 　Renal transplantation　Acute rejection　Interleukin-6

　　肾移植急性排异反应是导致肾移植失败的主要原因。早期诊断和及时治疗是治疗成败的关键。免疫学监测方法，目前仍是应用于临床诊断肾移植急性排异反应的主要手段。我们在此研究中选用血、尿IL-6水平测定做指标，观察肾移植术后患者多种不同病理状态下IL-6的变化情况，以对IL-6水平测定在肾移植急性排斥反应诊断及鉴别诊断中的作用，作一较全面的评估。

材料和方法

　　一、研究对象　本组接受肾移植患者共53例，男33例，年龄42±6.5岁，女20例，年龄38±8.3岁。术后常规予CsA+强的松(Pred)+硫唑嘌呤(Aza)三联治疗，根据病人情况作以下分组，诊断标准参照文献［1］。
　　1.急性排斥(acute rejection,AR)组：21例，诊断急性排斥反应根据临床表现如发热、移植肾区胀痛、少尿、移植肾肿大等，并结合B超、彩色超声多普勒、移植肾核素扫描等检查，部分病例经移植肾活检确诊。
　　2.CsA中毒组：8例，诊断根据患者伴或不伴少尿，轻至中度血肌酐升高，移植肾无肿大、无压痛，血CsA浓度测定均>800μg/L。
　　3.ATN组：5例，诊断根据术后无尿或少尿，血肌酐不降、部分病例经肾活检确诊。
　　4.合并感染组：8例，其中3例为巨细胞病毒(CMV)感染(血CNV-DNA-PCR阳性)，5例为肺部细菌感染，患者表现为发热、血肌酐轻度升高。
　　5.移植肾功能稳定(stable transplantation,ST)组：11例，均为术后3个月～2年，肾功能正常，定期在我院肾移植门诊随诊者。
　　6.另设10例正常人作正常对照组。
　　所有研究对象均于确诊当日，治疗前及治疗后分别留取血、尿标本。血标本，不抗凝，血块回缩后2 000r/min，10分钟离心取血清，以无菌冻存管保存于-20℃冰箱，避免反复冻溶。尿标本，于2 000r/min，10分钟离心后，用无菌冻存管保存于-20℃冰箱。避免反复冻溶。
　　二、IL-6活性测定　采用ELISA方法，具体按药盒说明进行。ELISA药盒购自法国国际免疫试剂公司。
　　三、数据处理　数据用均数±标准差表示，显著性检验采用t检验及卡方检验。

结　　果

　　一、各组患者血清IL-6水平　见表1。可见急性排斥及感染时患者IL-6水平明显升高。

表1　肾移植患者血清IL-6变化情况

表2　肾移植患者尿IL-6变化情况

讨　　论

　　目前已知，IL-6 是由机体多种细胞产生的具有多种生物活性的细胞因子，机体的淋巴类细胞及非淋巴类细胞均能产生IL-6，是机体复杂的细胞因子网络中的一个重要成员，促进并调节了诸如免疫系统、造血系统、炎症反应中多种细胞的增殖和分化^［2］。在移植免疫中，IL-6可刺激B细胞增殖及分化，促进成熟的B细胞产生免疫球蛋白，也可直接促进T细胞增殖、分化，参与并诱导T淋巴细胞生成细胞毒性T淋巴细胞(CTL)^［3］。在肾移植急性排斥反应发生时，肾小管上皮细胞、肾小球细胞、血管内皮细胞、间质细胞及间质浸润细胞^［4］等广泛部位均明显地表现出IL-6的增多，这也提示IL-6在急性移植排斥反应中起了重要作用。
　　用血、尿IL-6水平的测定来监测肾移植急性排斥反应，最早由Van Oser等报道^［5］，他们发现血、尿IL-6水平的升高，可在出现临床排斥症状前1～2天即已出现，因而还有早期诊断排斥反应发生的作用。近年来，国内也陆续有了相似的报道，但这些研究大多采用IL-6细胞依赖株进行测定。我们采用了敏感而准确、快捷的ELISA方法，发现急性排斥患者血、尿IL-6水平是明显升高的，较CsA组、ATN组、正常移植肾功能组及正常人，均有显著性的升高(P<0.05)，并随着排斥反应逆转，血、IL-6水平也随之下降。说明血尿IL-6水平的检测可作为肾移植后急性排斥反应诊断和鉴别诊断的依据之一。
　　有作者应用血中多种细胞因子的监测来鉴别感染及排斥，发现血中IL-6水平的升高，在感染及急性排斥中是有差异的，前者为6±10ng/L，后者为16±35ng/L(P=0.01)^［6］。我们的检测结果则发现感染患者血IL-6同急性排斥反应者无显著性差异，而尿IL-6则较急性排异者显著减少(P<0.05)。这结果提示，同时测血、尿IL-6水平，可用于鉴别急性排斥及感染，因这两种情况在临床上十分普遍，且鉴别诊断存在一定的困难。
　　细胞因子测定还被用于鉴别急性排斥与CsA中毒。在急性排斥时血IL-6水平明显升高为65.2±13.3U/ml，而CsA中毒者则是明显降低的，为1.4±0.18U/ml^［7］。在我们的研究中，也发现急性排斥患者血、尿的IL-6水平较CsA中毒及ATN均有显著的升高，提示血、尿IL-6测定，对CsA中毒及ATN具有鉴别意义。

参　考　文　献

1　叶任高，沈清瑞.肾脏病诊断与治疗学.北京：人民卫生出版社，1994.691～693.
2　Riechmann P,Alessandro F,Nordan RP,et al:IL-6 and tumor necrosis factor-alpha.J Immunol，1991,146:3462～3468.
3　German RD,Jacobs KA,Clark SC,et al.B-cell-stimulating factor 2 (beta-2 IFN) functions as a second signal for interleukin 2 production by mature murine T cell.Proc Natl Acad Sci USA,1987,84:7629～7632.
4　Merville-P.Production of IFN gamma,IL-6 and IL-10 by infiltrating cells of renal allografts and irreversible rejection:modulation by IL-2 and IL-4.Nephrologie,1995,16:243～245.
5　Van Oser,Heyden VD,Adrden A.Interleukin 6(IL-6) in serum and urine of renal transplant recipients.Clin Exp Immunol, 1988,71:314～319.
6　Daniel V,Pasker S,Reiss U,et al.Plasma GM-CSF,IL-6,and IL-3 mornitoring allows differentiation between infection and rejection in some renal transplant recipients:preliminary results of a retrospectie study.Transplant Proc,1993,25(1pt2):893～896.
7　Yoshimura N,Oka T,Kahan BD.Sequential determinations of serum interleukin 6 levels as immunodiagnostic tool to differentiate rejection.Transplantation,1991,51:172～176.

(收稿：1997-11-15　　修回：1998-03-21)

(本文编辑：李耀荣)