中华内科杂志
1999年第3期 No.3 1999 | 急进性肾炎患者抗肾小球基底膜抗体及
抗中性粒细胞胞浆抗体的检测及其临床意义刘娜 赵明辉 章友康 王海燕 急进性肾炎(RPGN)依据免疫病理可传统地分为三型，Ⅰ型：抗肾小球基底膜（GBM）型；Ⅱ型：免疫复合物型；Ⅲ型：微量免疫复合物型，其中Ⅲ型中约50%～70％抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)阳性。既往我国抗GBM抗体及ANCA在RPGN中的阳性率分别为5％～10％、0～15％，明显低于国外报道［1］，其原因尚不清楚。本研究应用ELISA法系统地对23例RPGN患者血清进行了抗GBM抗体及六种抗原特异性ANCA的检测，并对其临床分型中的意义进行了分析。
一、资料和方法
1.病例与分组：病例均来自1991年1月～1996年10月住我院肾内科肾活检的病人。RPGN组（狼疮新月体肾炎除外）23例，均符合1993年黄山会议的诊断标准。对照组选自100例同期经肾活检证实的非新月体肾小球疾病患者,其中IgA肾病20例、系膜增殖性肾炎15例、微小病变20例、膜性肾病20例、膜增殖性肾炎5例、过敏性紫癜肾炎20例。58例正常血清来自正常献血员。
2.抗GBM抗体的检测：根据Bowman的方法制备可溶性人GBM抗原［2］，用ELISA法检测抗GBM抗体。
3.ANCA的检测：应用纯酒精固定的白细胞玻片进行间接免疫荧光法（IIF）法检测ANCA，并应用 提纯的蛋白酶3（PR3）、髓过氧化物酶（MPO）、杀菌/通透增强蛋白（BPI）、乳铁蛋白（LF）、组蛋白酶G（CG）、人白细胞弹性蛋白酶（HLE）（英国剑桥大学小血管炎研究中心提纯）用ELISA法检测抗原特异性ANCA。
二、结果
1.抗GBM抗体及ANCA的检测：23例RPGN患者抗GBM抗体阳性率占21.7％（5/23）, 对照组均为阴性；RPGN 患者ANCA阳性率为43.5％（10/23）。对照组IIF 法均阴性，ELISA法仅4例BPI－ANCA呈弱阳性；其中1例RPGN患者抗GBM抗体同时伴较低滴度抗MPO-ANCA阳性。
ANCA阳性的10例患者，IIF检测，C-ANCA 4例，P-ANCA 6例。ELISA显示ANCA特异性抗原成分主要为MPO、PR3(表1)。表1 抗肾小球基底膜抗体及ANCA阳性急进性肾炎患者检测结果 |
| | 例号 | | 诊 断 | 年龄
(岁) | 抗
GBM* | ANCA
IIF | ANCA ELISA(%) | | MPO-ANCA① | PR3-ANCA② | BPI-ANCA③ | HLE-ANCA④ | LF-ANCA⑤ | CG-ANCA⑥ | | 1 | 急进性肾炎Ⅲ型 | 39 | - | C | - | 53 | - | - | 36 | - | | 2 | 急进性肾炎Ⅲ型 | 36 | - | C | - | 78 | 34 | 94 | - | - | | 3 | 急进性肾炎Ⅲ型 | 22 | - | C | - | 103 | - | 169 | - | - | | 4 | 急进性肾炎Ⅲ型 | 41 | - | C | - | 96 | - | - | - | - | | 5 | 急进性肾炎Ⅲ型 | 22 | - | P | 17 | - | - | - | - | - | | 6 | 急进性肾炎Ⅲ型 | 40 | - | P | 36 | - | 29 | - | - | - | | 7 | 急进性肾炎Ⅲ型 | 57 | - | P | 97 | - | - | - | - | - | | 8 | 急进性肾炎Ⅲ型 | 21 | - | P | 103 | - | - | - | - | - | | 9 | 急进性肾炎Ⅲ型 | 61 | - | P | 96 | - | - | 48 | - | - | | 10 | 急进性肾炎Ⅰ型 | 17 | 106 | - | - | - | - | - | - | - | | 11 | 急进性肾炎Ⅰ型 | 32 | 100 | - | - | - | - | - | - | - | | 12 | 急进性肾炎Ⅰ型 | 18 | 50 | - | - | - | - | - | - | - | | 13 | 急进性肾炎Ⅰ型 | 18 | 82 | - | - | - | - | - | - | - | | 14 | 急进性肾炎Ⅰ型 | 52 | 66 | P | 15 | - | - | - | - | - |
| 注：ANCA：抗中性粒细胞胞浆抗体；GBM：肾小球基底膜；IIF：间接免疫荧光法；MPO：髓过氧化物酶；PR3：蛋白酶3；BPI：杀菌/通透增强蛋白；HLE：人白细胞弹性蛋白酶；LF：乳铁蛋白；CG：组蛋白酶G；*正常值<14%；①～⑥正常值分别为<10%、<11%、<22%、<11%、<14%、<16% 2.抗GBM抗体及ANCA阳性患者临床病理特点：5例抗GBM抗体阳性的RPGN患者以青年男性为主,肾活检病理以细胞或细胞纤新月体为主。4例行免疫荧光检测，仅1例见到典型的IgG沿GBM线样沉积，其余3例均伴有细颗粒样沉积。临床上全身系统表现较少, 就诊时，已有4例患者依赖透析治疗。经强化甲基泼尼松龙及环磷酰胺（CTX）冲击治疗，仅1例不伴少尿及血肌酐未达尿毒症水平的患者脱离透析，其余4例均依赖透析。9例单纯ANCA阳性患者，大多数患者均伴有不同程度的全身表现,如发热、咳血、关节痛、肌肉痛、眼耳鼻喉受累及血管病变等。肾脏病理主要以细胞新月体为主，有4例患者光镜下见到毛细血管襻纤维素样坏死。肾活检组织的直接免疫荧光大多数仅有微量免疫复合物。就诊时已有5例开始血液透析，除1例患者于肾活检后2日死于大咯血，另8例患者全部经强化免疫治疗，全部患者于治疗后脱离透析，肾功能不同程度得到恢复。
讨论 1.本研究应用ELISA方法对我院近6年来的23例RPGN患者血清中抗GBM抗体和6种抗原特异性ANCA进行检测，5例抗GBM抗体阳性，占21.7％，10例ANCA阳性，占43.5％, 提示抗GBM抗体型RPGN和ANCA相关的RPGN并不少见，二者之和占RPGN患者的60.9％（14/23）。
2.本研究在我国首次系统地对RPGN病人进行了大部分已知ANCA靶抗原的检测， RPGN患者的主要ANCA靶抗原亦为MPO和PR3，与国外报道相似［3］。
3.抗GBM抗体及ANCA作为RPGN免疫病理分型中重要的血清学检测工具，具有重要临床意义。我们制备了 可溶性GBM抗原并建立了ELISA法检测抗GBM抗体［4］。由于多种ANCA的靶抗原被发现并与不同的临床疾病相关［5］，因此，目前对RPGN患者做IIF结合抗原特异性ANCA的检测已在发达国家成为常规。国内以往报道的抗GBM抗体及ANCA阳性率较低可能与未对RPGN患者常规行上述抗体检测及某些检测方法不够灵敏有关。
4.与ANCA阳性患者相比，尽管抗GBM抗体阳性患者发病就诊时间相似，病理表现相似，经相同的强化免疫抑制治疗，4/5例未能脱离透析, ANCA阳性的患者经过治疗后肾功能有不同程度的恢复，5例依赖透析的患者全部脱离透析，说明抗GBM抗体阳性病人预后差，而ANCA阳性病人预后相对好。因此，早期进行抗GBM抗体和ANCA的检测对于进行合理治疗、判断预后是极为重要的。 作者单位：100034 北京医科大学第一医院肾内科、北京医科大学肾脏病研究所参考文献 1 Couser WG. Rapidly progressive glomerulonephritis: classification, pathogenetic mechanism and therapy. Am J Kidney Dis,1988,11:449-464.
2 Bowman C, Lockwood CM. Clinical application of radio-immunoassay for auto-antibodies to glomerular basement membrane. J Clin Lab Immunol, 1985,17:197-202.
3 Kallenberg CG, Brouwer E, Weening JJ, et al. Anti-neutrophil cytoplasmic antibodies: current diagnosis and pathophysiological potential. Kidney Int, 1994, 46:1-15.
4 刘娜，赵明辉，章友康,等. 急进性肾炎中抗肾小球基底膜抗体的检测及其临床意义.中华内科杂志，1998，37:184-185.
5 Zhao MH, Lockwood CM. ANCA defines the clinical disease manifestations of vasculitis. Sarcoidosis Vasc Diffuse Lung Dis, 1996, 13:221-226.(收稿：1998-03-11 修回：1998-06-08)
(本文编辑：李敬东) |
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