SLE患者血清sICAM-1测定及皮损ICAM-1表达的研究

张开明　郭志杰　尹兴平　尹国华

　　我们采用夹心ELISA法对SLE患者血清中可溶性ICAM-1(sICAM-1)水平进行测定，并采用免疫组化法对部分病例皮损ICAM-1表达进行了研究，现将结果报告如下。

1　资料与方法
1.1　病例选择：SLE患者共48例，取自1994年8月—1997年5月皮肤科门诊及住院患者，部分病例由我院内科及外院提供，女33例，男15例。诊断标准以1982年美国风湿病学会修订的诊断标准为依据，其中活动期27例，稳定期21例，活动期判断标准参照Valentijn法^〔1〕，采用临床症状评分，＜10分者为静止期，＞11分者为活动期。正常对照组51名。
1.2　方法：试剂：sICAM-1试剂盒为比利时Medgenix产品，鼠抗人ICAM-1单克隆抗体及过氧化酶标记的链霉卵白素(SP)试剂盒均为Zymed产品，购自北京中山试剂公司。
　　血清sICAM-1测定：静脉抽血2 ml，分离血清，置于－40 ℃备用待测，采用双抗体夹心ELISA法^〔2〕，最后置芬兰Labsystems全自动酶标仪450 nm及650 nm(双波长法)处测各孔吸光度A值，用标准品浓度及A值绘制标准曲线，从中求得sICAM-1含量。
　　皮损免疫组化：共做9例，取皮损及正常皮肤，正常对照组8例为手术科室切除的正常皮肤组织，采用SP免疫组化法，常规石蜡切片脱蜡至水，3%H₂O₂室温孵育5分钟，冲洗后PBS浸泡5分钟，10%正常山羊血清封闭10分钟，吸去血清，滴加ICAM-1一抗(每次均设阴性对照)，40 ℃过夜，PBS冲片3次，滴加1%BSA-PBS1∶300稀释的二抗，37 ℃孵育30分钟，PBS冲洗3次，37 ℃DAB显色15～30分钟，自来水冲洗，苏木素复染，中性树胶封片，置显微镜下观察，阳性时在标记处可见棕色颗粒沉积。
　　常规检查项目：血沉、补体、IgG、IgA、IgM及ANA、抗dsDNA抗体、ENA多肽抗体谱、LBT等。
1.3　统计学处理：将sICAM-1复孔均值及常规检测项目数据输入电脑,采用SPSS软件包进行t检验(双侧检验)及相关分析。

2　结　果
2.1　SLE患者血清sICAM-1测定结果见表1。

表1　SLE患者血清sICAM-1水平测定(±s)

表2　血清sICAM-1水平与ANA、抗dsDNA抗体、血沉及补体等相关分析结果

3　讨　论
3.1　sICAM-1是细胞表面ICAM-1“脱落”进入血清而形成的，正常人血清中sICAM-1水平约100～200μg/L，其主要生物学作用是与细胞膜ICAM-1竞争性结合白细胞表面相应配体，在炎症和免疫反应以及局部炎症细胞浸润中发挥作用^〔3〕。
3.2　SLE是一自身免疫引起的持续性慢性炎症反应性疾病，通过对SLE患者皮损ICAM-1免疫组化染色及血清sICAM-1水平测定，进一步显示ICAM-1在SLE发病中具有一定的意义。目前认为ICAM-1在SLE局部皮损中的作用可能有下述三方面影响：①参与皮损局部炎症细胞浸润；②参与基底细胞液化变性或细胞破坏；③通过抗原提呈作用，激活T淋巴细胞参与免疫调节反应。
3.3　本结果显示，SLE患者血清sICAM-1水平与正常对照组比较显著增高，而且活动期又明显高于稳定期，且sICAM与ANA滴度、抗dsDNA抗体及血沉等具有较好的正相关关系，而与补体及免疫球蛋白无明显的联系。综合新近报道及本研究结果，我们认为血清中增高的sICAM-1在SLE发病中可能有两方面的意义：①sICAM-1通过与血管内皮细胞ICAM-1竞争性结合白细胞表面的LFA-1配体，从而对白细胞粘附于内皮细胞、透过血管壁有抑制作用；②最近，延藤俊子等^〔4〕对SLE患者血清sICAM-1水平进行了动态观察，结果表明SLE血清sICAM-1水平明显高于正常对照组，动态测定发现血清sICAM-1与SLE临床轻、重程度有很好的平行关系。结合我们研究结果，推测sICAM-1可能会成为监测SLE疾病活动的一个新的指标。

作者单位：030009太原市中心医院皮肤科

参考文献
　[1]Valentijn RM,van Overhagen H,Hazev-oet HM,et al.The value of complement and immune complex determinations in monitoring disease activity in patients with systemic lupus erythematosus.Arthtitis Rheum,1985,28:904
　[2]张开明，尹兴平，杨小英，等.银屑病患者血清中细胞间粘附分子的检测.中华皮肤科杂志，1998，31：109
　[3]古江增隆.炎症とサイトカイン.日皮会誌，1995，105：1632
　[4]延藤俊子，影下登ㄘ郎，幸田卫，等.SLE患者血清中にねけゐ soluble ICAM-1.日皮会誌，1995，105：575

(收稿：1998-03-06　修回：1998-07-29)

(本文编辑：臧长海)