系统性红斑狼疮与IL-12

张凤山　支玉香　谭静澜　王振宇　卢滨　吴长有

　　IL-12即自然杀伤细胞刺激因子，有很强的免疫调节作用，已知它在Th₁细胞介导的自身免疫病尤其是器官特异的自身免疫病中发挥重大作用，而在系统性自身免疫病中的作用仍不清楚，本研究旨在探讨IL-12与SLE的关系，以进一步揭示SLE的发病机制，探索新的治疗途径。

1　资料和方法
1.1　病例选择：①本研究选择18例SLE住院病人，均为重症患者(即有肾脏或中枢神经系统损害的患者)，其中男1例，女17例，均符合1982年美国风湿病协会SLE的诊断标准。平均年龄27.35岁。②选择13名健康职工做对照，其中男2名，女11名，平均年龄30.27岁。
1.2　实验材料：本实验应用的所有IL-12及IL-12P₄₀的标准品、包被液、抗原、抗体等试剂均由美国Hoffmann-La Roche,Inc.提供。
1.3　实验方法：实验操作方法均由美国Hoffmann-La Roche,Inc.提供。具体如下：每位受试者均采5 ml外周血，抗凝，加分层液分离淋巴细胞，细胞悬浮于含有AB型血清的培养液中，在5%的CO₂孵箱内培养，其中每份淋巴细胞分两份，一份加脂多糖(LPS)刺激，一份不加。培养48小时后取上清液。用ELISA双抗体夹心法检测IL-12及IL-12P₄₀的浓度，所有结果采用±s表示，用t检验方法检测各组间差异的显著性。

2　结　果
　　SLE病人及正常对照组外周淋巴细胞培养上清液IL-12及IL-12P₄₀的水平结果见表1。

表1　SLE病人及正常对照组外周淋巴细胞培养上清液IL-12及IL-12P₄₀的水平(±s)ng/L

3　讨　论
　　IL-12由单核细胞、B细胞和其他抗原提呈细胞产生，由两条多肽链即P₃₅和P₄₀经二硫键组成的异二聚体。
　　体内外研究均证实IL-12具有许多生物活性，尤其对单个核细胞的作用非常重要，因为它的活性直接影响NK细胞和Th细胞亚群，Th细胞据产生的细胞因子的不同分三类，即Th₀、Th₁和Th₂细胞，在免疫应答的早期，Th₁和Th₂细胞发育受环境中细胞因子的影响，特别是IL-12和IL-4有决定性作用^〔1，2〕。IL-12可诱导Th₀向Th₁细胞分化，诱导Th₁细胞分泌IL-2和IFN-γ。
　　本实验研究结果表明，SLE病人无论活动期或缓解期，不管是否应用LPS刺激，其产生的IL-12及IL-12P₄₀的水平低于正常对照组，尤以活动期明显，与缓解期与对照组差异显著，分析此结果与以下因素有关：①已知IL-12诱导Th1细胞的发育，当IL-12分泌减少时，Th₁细胞的发育受抑制，Th₁细胞产生的细胞因子减少。已有文献报道SLE病人体内的IL-1b、IL-2和IFN-γ的基因表达水平与正常人比降低或检测不到^〔3〕，细胞免疫功能降低。②IL-12分泌减少，导致Th1细胞及其分泌细胞因子的减少，则对Th₂型的细胞因子的抑制减弱，导致Th₂型细胞因子分泌增多。文献〔3〕报道SLE病人体内有较高水平的Th₂细胞因子基因的表达，包括IL-14、IL-6和IL-10，使得SLE病人体液免疫功能增强，产生自身抗体。③研究已表明SLE病人体内有较高水平的IL-10，它能增强B细胞的活性，使其产生自身抗体^〔4〕，而IL-10是合成IL-12的强力抑制物^〔5〕，因此SLE中高水平的IL-10可降低IL-12的水平。
　　许多研究已证实SLE病人存在许多细胞因子的异常，但IL-12与SLE的关系迄今国内外尚无报道。目前研究表明IL-12在许多器官特异的自身免疫病如EAE、IDDM及CIA中起关键作用。因为这些疾病均为Th1细胞介导的自身免疫病，而IL-12诱导Th0向Th1细胞分化，使Th1型细胞因子产生增多。动物实验表明给鼠注射IL-12，可以增强Th1细胞因子的反应，提高细胞免疫，而且抑制Th2型细胞因子的反应，降低体液免疫反应，可能通过增强NK和CTL反应，诱导IFN-γ的产生而发挥其抗肿瘤作用。相信随着基础医学及临床研究的不断进展，进一步阐明IL-12与SLE的关系，对SLE的病因探讨起重要作用，并将为SLE的治疗提供理论依据及新方法。

作者单位：150086哈尔滨医科大学附属二院(张凤山、支玉香、谭静澜、王振宇、卢滨)，哈尔滨医科大学基础医学院免疫研究室(吴长有，现在美国Hoffmann-La Roche,Inc.工作)

参考文献
　[1]Trinchieri G.Interleukin-12 and its role in the generation of Th₁ cell.Immunol Today,1993,14:335-338
　[2]Paul WE，Seder RA.Lymphocyte responses and cytokines.Cell,1994,76:241-251
　[3]Richaud Patin Y,Alcocer Varela J,Llorente L.High levels of Th₂ cytokine gene expression in systemic lupus erythematosus.Rev Invest Clin,1995,47:267-272
　[4]Llorente L,Ziu W,Levy Y,et al.Role of interleukin 10 in the B lymphocyte hyperactivity and autoantibody production of human systemic erythematosus.J Exp Med,1995,181:839-844
　[5]D′Andrea A,Aste Amezaga M,Valiante NM,et al.Interleukin 10 (IL-10) inhibits human lymphocyte interferon-γ production by suppressing natural killer cell stimulatory factor/IL-12 synthesis in accessory cells.J Exp Med,1993,178:1041

(收稿：1998-01-20　修回：1998-08-24)

(本文编辑：杨金萍)