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小鼠白介素-6(mouse IL-6) |
产品目录 | |
产品编号 | 1065 |
产品名称 | |
中文产品名称 | |
英文产品名称 | |
方法 | 酶联免疫/酶免法(ELISA) |
| 规格 | 96T |
| 报价(price) | 4300元 |
| 备注(memo) | 原装进口 |
| 关键词(keyword):IL-6 , mouse IL-6 , mouse 白介素-6 , mouse白介素-6 , 白介素-6 , 白介素-6(IL-6) , 小鼠 IL-6 , 小鼠 白介素-6 , 小鼠IL-6 , 小鼠白介素-6 | |
说明书 | |
用途: | |
临床意义: 1980年发现成纤维细胞经Poly I-C刺激后能产生一种抑制病毒复制的细胞因子,称为β2干扰素(IFN-β2)。以后的研究结果未能证实这种因子的直接抗病毒作用，但具有其它多方面的生物学功能，根据实验系统和功能的不同，被命名为杂交瘤/浆细胞瘤生长因子(hybridoma/plasmacytoma growth factor, HPGF)，B细胞分化因子(B cell differentiation factor, BCDF)，B细胞刺激因子-2(B cell stimulatory factor 2, BSF-2)，26kDa,溶细胞性T细胞分化因子(cytolytic T cell differentiation factor, CDF)和肝细胞刺激因子(hepatocyte stimulating factor,HSF)等。1986年统一命名白细胞介素6(interleukin 6，IL-6)。 1. IL-6的产生 淋巴样和某些非淋巴样细胞均可产生IL-6。 (1)T细胞: T细胞产生IL-6依赖于巨噬细胞或PMA。抗原提呈细胞刺激相应的T细胞克隆，以及HTLV-I感染的T细胞系等均可分泌IL-6。 (2)B细胞: 如SAC刺激而活化的B细胞。 (3)单核细胞: LPS刺激单核细胞产生IL-6，某些单核细胞系如P388D1也可分泌IL-6。 (4)成纤维细胞: 可自发产生IL-6，其它因子或刺激物如IL-1、TNF、PDGF、IFN-β、PolyI-C、A23187、PMA等可促进IL-6的产生。 (5)肾小球系膜细胞、角朊细胞、内皮细胞等在一定培养条件下均可产生IL-6。此外， 肿瘤细胞或细胞系如MG63成骨肉瘤、T24膀胱癌、A549肺癌、7860肾癌、SK-MG-4神经胶质母细胞瘤、U373星状细胞瘤、心脏粘液瘤细胞和骨髓瘤细胞等也能分泌IL-6。最近发现垂体前叶中的滤泡椥亲聪赴?folliculostellate)可产生IL-6，可能与败血症时LPS刺激导致GH、ACTH等激素水平升高有关。 IL-1、TNF、IFN-β、PDGF、LPS、PolyⅠ-C、A23187 和PMA等对IL-6的产生具有正调节作用。 2. IL-6的分子结构和基因 1985年Kishimoto等从人T细胞中首先获得IL-6 cDNA克隆成功，人IL-6基因与小鼠有65％同源性。人IL-6基因位于第7号染色体，长约5kb， 有5个外显子和4个内含子。 图4-1 IL-6基因的功能调节区 在IL-6基因功能调节区基因中存在着几种转录控制元件(transcriptional control ele-ment)，如糖皮质激素反应元件(glucocorticoid responsive elements, GRE)、AP-1结合位点、c-fos 血清反应元件同源物 (c-fos serum responsive element homology,c-fos SRE homology),cAMP反应元件(cycli AMP responsive element, CRE)和NF-κB结合位点。IL-1、TNF 等细胞因子可使 IL-6启动子很快发生一过性的活化。 IL-1反应的元件在IL-6启动基中-180/-123;IL-6核因子(NF-IL-6)识别一段特殊的14bp,ACATTGCACAATCT。多反应元件(multi- response element, MRE)位于c-fos SRE同源区内，这个区域对IL-1、TNF、forskolin和PMA诱导 IL-6产生有关；与IL-1、TNF刺激TL-6产生有关的NF-κB位于TATA盒的上游。 人IL-6分子由212个氨基酸残基组成，包括28个氨基酸残基的信号序列，成熟IL-6为184氨基酸残基，分子量26kDa。IL-6分子由4个α螺旋和C端(175～181位氨基酸) 受体结合点所组成，其中179位精氨酸残基对于与受体的结合非常重要。 分子中糖基对生物学活性功能并非必需，N端23个氨基酸残基虽不直接与IL-6生物学活性有关， 但对整个IL-6分子组成起稳定作用。人IL-6氨基酸序列与小鼠IL-6有42％同源性，人的IL-6对小鼠某些细胞有刺激作用。IL-6 与G-CSF和IFN-β有较高同源性，对骨髓造血细胞和髓样白血病细胞的某些作用也有相似之处。 3. IL-6的受体 目前已知，IL-6R 至少由称之为IL-6结合受体蛋白 (IL-6 binding receptor protein)和称为信号转导蛋白(signal-transducing protein)的gp130所组成，习惯上前者称之IL-6R。 (1)IL-6R(CD126):人IL-6R由468个氨基酸组成,切除N端19个氨基酸残基后的成熟分子有449氨基酸，胞膜外区、穿膜区和胞浆区分别为339、28和82个氨基酸,分子量为80kDa, 6个N糖基化位点。胞膜外区由一个Ig样区(C2，约100氨基酸)、2个Ⅲ型纤维结合蛋白结构 (各含100氨基酸)及1个细胞因子受体的同源区所组成，后者含4个保守的Cys和一个WSXWS结构。单独 IL-6R与IL-6结合为低亲和力。IL-6R分布于淋巴样细胞和非淋巴样细胞，如活化B细胞、EBV转化B细胞、急性淋巴母细胞白血病细胞、骨髓瘤细胞、静止T细胞、肝细胞、单核细胞、急性髓样白血病(AML)细胞、嗜铬细胞瘤细胞等。 (2)gp130(CDw130): 分子量为130kDa的糖蛋白，共有14个潜在N-糖基化位点，胞膜外区、穿膜区和胞浆区分别有597、22和277个氨基酸。胞膜外区有1个Ig C2区，6个Ⅲ型纤维结合蛋白的结构,其中第二个和第三个结构区之间有4个保守的Cys和WSXWS结构的区域,形成1个细胞因子受体家族结构特征的结构域。Gp130不能直接与配基IL-6结合，在生理情况下， IL-6与IL-6受体结合后使IL-6R的构象发生变化并迅速与两个gp130分子结合，形成高亲和力的结合位点，并通过gp130亚单位传递信号。人和小鼠gp130在氨基酸水平上有77％的同源性。转染gp130 cDNA小鼠pro-B细胞在 IL-6/sIL-6R复合物刺激下可传递增殖信号。小鼠体内注射IL-6可增加 gp130 mRNA的表达。目前已证实，gp130除组成IL-6高亲和力受体外，也是白血病抑制因子(LIF)、抑瘤素M(OSM)、睫状神经营养因子(CNTF)和IL-11等受体所共用的亚单位。 (3)信号转导: gp130与IL-6/IL-6R复合物结合后， 刺激gp130胞内部分发生酪氨酸磷酸化，目前关于参与此过程的酪氨酸蛋白激酶的作用还不清楚。酪氨酸激酶被激活后继而引起丝氨酸 /苏氨酸激酶如丝裂原活化的蛋白激酶(mitogen activated protein kinase, MAPK)的激活，使NF-IL-6中丝氨酸和苏氨酸磷酸化而被激活，从而促进相应基因的活化。 (4)sIL-6R: 存在于正常人尿、骨髓瘤细胞系U266培养上清，PHA活化人PBMC以及HTLV-I阳性细胞也能分泌sIL-6R, 分子量为50kDa。用反转录PCR从正常人细胞和骨髓瘤细胞中均分离出编码sIL-6R mRNA，序列分析表明与膜结合受体相应区域序列一致。sIL-6也可从膜结合的IL-6R(mIL-6)脱落而来。sIL-6R与IL-12 p40亚基具有高度同源性, 而 IL-6与IL-12的p35亚基序列高度同源。因此可以推测类似于IL-6/sIL-6R复合物的IL-12分子可能也通过类似于gp130分子作用于细胞。与其它可溶性细胞因子受体不同， sIL-6R结合IL-6后可与细胞膜表面gp130结合，增强IL-6的刺激活性。而可溶性gp130(sgp130) 可抑制sIL-6R/IL-6复合物的活性。sIL-6R水平的升高与某些自身免疫性疾病有关。 图4-2 IL-6受体信号传递的模式图 4. IL-6的生物学活性 (1)刺激细胞生长: IL-6可促进多种细胞的增殖，如B淋巴细胞杂交瘤、浆细胞瘤、EBV转化的B细胞、T细胞、 PMA和IL-4刺激的胸腺细胞、造血干细胞、角朊细胞和肾小球系膜细胞。 (2)促进细胞分化: 如B细胞分化和Ig的分泌，CTL分化，协同IL-2增强CTL中穿孔素基因的表达，并增加T细胞IL-2产生和IL-2R表达，诱导巨噬细胞、神经细胞和NK细胞分化。协同IL-3促进干细胞分化和巨核细胞的成熟。明显促进小鼠骨髓移植后免疫功能的重建。 (3)加速肝细胞急性期蛋白(acute phase protein)的合成。 (4)抑制M1髓样白血病细胞系的生长,促进其成熟和分化；抑制黑素瘤、乳腺癌细胞生长。 5. IL-6与临床 IL-6与临床上多种疾病的发生有一定的关系。 (1)IL-6与自身免疫性疾病 ①心脏粘液瘤: 患者往往表现为高丙球蛋白血症，有多种自身抗体以及急性期蛋白升高。培养的粘液瘤细胞含有IL-6和IL-6 mRNA，患者血清中IL-6明显升高，骨髓中可见有IL-6依赖的多克隆浆细胞增殖。手术后上述症状和体症可见逐渐消退。 ②Castleman氏病: 患者表现为高丙球蛋白血症，急性期蛋白和血小板升高，增生的淋巴结生发中心中B淋巴样细胞产生IL-6，其中某些患者可发展成为多发性骨髓瘤。 ③类风湿性关节炎: 表现为多克隆性浆细胞增多症，自身抗体、C反应蛋白(CRP)和血小板升高。急性期血清以及关节的滑液中能测到IL-6，滑液中IL-6与IgG以及血清中IL-6与C反应蛋白之间有明显的相关性。患者的T细胞、B细胞、滑膜细胞以及软骨细胞均可产生IL-6。 ④艾滋病: 与艾滋病患者多克隆B细胞活化有关，HIV感染诱导单核细胞产生IL-6可能引起血清中IL-6水平的升高。此外，IL-6可能是Koposi氏肉瘤的主要生长因子之一, 反义IL-6基因在体内可抑制Koposi氏肉瘤细胞的生长。 (2)IL-6与肿瘤 ①浆细胞瘤形成: 慢性炎症诱导IL-6生物合成增加与浆细胞瘤的发生有关。如用石腊或降植烷腹腔刺激小鼠，诱导炎症，可诱导出较高比例的浆细胞瘤。在患者也可见到类似情况，如早先发生的类风湿性关节炎可能与浆细胞瘤形成有关。在体外，IL-6可促进浆细胞瘤和骨髓瘤细胞的生长，某些浆细胞瘤细胞生长依赖于IL-6的存在。 ②可能通过自分泌机理与非Hodgkin氏淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病和急性髓样白血病的发病有关。血清中IL-6水平与多发性骨髓瘤如浆细胞白血病病情严重程度有关。多发性骨髓瘤患者不仅骨髓细胞表面IL-6R表达增加，而且血浆中sIL-6R水平明显升高。 (3)IL-6与膜增生性肾小球肾炎(mesangial proliferative glomerulonephritis, MPG):MPG患者尿中可测出IL-6，而且其水平与疾病的发展有关。 体外培养的患者肾小球膜细胞可产生IL-6，提示MPG的发生与IL-6的自分泌有关。 IL-6转基因小鼠可出现某些与临床上相似的变化，如血清中高浓度的IL-6和IgG1, 浆细胞增多症，MPG的发生以及骨髓中巨核细胞的成熟。 (4)烧伤和术后伴有血清IL-6水平增加。 (5)病毒性脑膜炎和脊髓膜炎小鼠的胶质细胞可分泌大量IL-6， IL-6又可促进脑胶质细胞分泌其它神经营养因子和神经生长因子。 (6)IL-6作用于下丘脑-垂体-肾上腺轴， 刺激ACTH和皮质激素的释放以及星状细胞合成内啡肽。 IL-1和TNF-α对IL-6引起的病理损伤可能有协同作用。 应用IL-6治疗放疗、化疗所致血小板减少症，癌症以及作为疫苗佐剂已进入临床试验。 | |
检测原理: | |
特异性(SPECIFICITY): | |
试剂盒组成(KIT CONTENT): | |
保存:贮藏于2-8℃. | |
样品类型(SAMPLE TYPES): | |
样品采集: | |
警告及注意事项: | |
准备工作: | |
操作步骤: | |
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